最近有一个话题吸引了很多微生物专家学者的热烈讨论:
《“无菌体液”(胸水、腹水、脑脊液、关节腔积液等)的细菌培养,是否可以注入肉汤(血培养瓶)中增菌?》不妨给大家分享一下各方的学术观点吧,如有不同见解,欢迎大家在文末留言讨论。
正方观点
可以增菌,可以提高检出率。
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增菌可以有效提高细菌培养的检出率,降低样本采样量不足带来的假阴性风险。检验医学网
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我们不能过分夸大采样污染。脑脊液穿刺本身就是一种小手术,需要严格消*,无菌操作,如果消*效果和无菌操作都做不到,如何保证可能直接造成患者神经中枢感染的侵入性操作的手术安全?
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我们应该慎重对待临床“珍贵标本”,不要希望临床再次送检。比如脑脊液,关节液,活检组织等,这些几乎不可再得样本。不是痰液或粪便,可以随时让患者重留取,也不像血液,可疑感染24h后再次抽取。留取此类样本会给患者带来很大痛苦和风险,这种医嘱患者依从性差。检验医学网
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许多样本的培养结果,并不是最终诊断,对于有些污染,我们要相信我们的临床同事有这个能力判定。医生会综合各种检查信息,判定样本检出细菌是否为污染菌,就像血培养,即使一套培养瓶中有一瓶培养出细菌,实验室并不能直接判断为污染,有过不少类似临床案例,需要与临床沟通,哪怕是一些阳性杆菌。正因为如此,国家新行标仍然推荐血培养至少2套(大家明明都知道临床执行存在困难),其主要目的应该是提高培养的阳性检出率,而协助判断是否污染只是一个相对次要方面。
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临床(包括检验科和临床医护人员)不能因为担心可能存在的采样污染,而对无菌体液不增菌。我们必须清楚,细菌培养的阳性检出对临床诊疗的意义非常大,不能和免疫比较,部分免疫项目85%的检出率临床就可以接受。对于细菌培养,我们必须不遗余力地追求%(肯定做不到),一份样本漏检,对这个患者而言,其意义不仅是%漏检,而且可能事关生死。
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能够无菌操作,是对全部医务人员专业素养的基本要求。发现血培养等无菌体液培养污染超过一定限度,应该及时对病区样本进行评估。
国际范围内,血培养污染率早已经是评价医疗质量的一个重要核心指标。如果发现某病区无菌操作有问题,应该加强人员培训,不能对珍贵临床样本的检验程序进行更改,通过”缩水”检验程序,以牺牲检验方法阳性率为代价来解决可能存在的采样污染。检验医学网
关于脑脊液等“无菌体液”培养需要增菌的建议,主要依据为《全国临床检验操作规程(第四版)》,在这个规程中,专家已经对采用血培养瓶对脑脊液增菌的局限性进行了让步性论述,也已经发现存在的问题和不足。
但这个不是不做脑脊液增菌的理由和根据。出现目前这种状况,是有一定原因的。目前,国内许多实验室都申请通过ISO质量管理体系认可(实际上,年国家卫计委在对医学检验实验室质量管理的发文中,已经把ISO管理体系作为对实验室质量管理的基本要求),在该质量管理体系中,关于试剂和耗材部分的管理部分,经常会成为现场评审专家开具不符合项时特别”偏爱”,换句话说,关键试剂和耗材的证书问题,特别是实验室自配试剂的“性能验证”部分,很容易被开具不符合项。
而且,由于标准菌株的获得、溯源问题,以及菌株转运中生物安全问题,开具的此类不符合项实验室往往很难整改,这就使得大家都不愿意碰触“自配试剂”这颗雷!(同样的问题还累及沙门菌和志贺菌的增菌问题)其实,像BHI、GBS等一些增菌肉汤的增菌效果还是不错的,甚至有些实验室明明有原装进口的优质干粉也不敢自配,看着它过期。
“有位老师吐槽道:这种过于“认真的管理”操作,似乎完全违背了质量管理的初衷。最后,没有办法,出于无奈,只要提到增菌,国内大部分实验室都把目光盯上了有证的血培养瓶,难道它就没有局限性?
任何质量管理,都应该以能否满足临床实验室检验实践需要为主要依据和初衷,否则就是一种误解,也是一种浪费!同样的事情,也曾经发生在药敏纸片的证书问题上,为了满足所谓的质量管理要求,实验室宁可不做!只要试剂能够满足基本质量要求,做过基本性能验证,我们在年度实验室现场质量督查时,就不会扣这个字眼。检验医学网
所以,在此也呼吁相关微生物质量管理专家、大咖在做相关质量评审、起草相关文件、法规的时候,一定要考虑临床工作的实际,听听一线工作人员的声音,在满足基本质量管理的前提下,一切以满足临床需求为首要目的。毕竟,相关的行业标准和法规应该以“托底”为目的,把握好国家卫生标准的底线即可。有部分实验室要争取做国际顶尖实验室,为国争光,完全支持,不过,不要把对这些实验室的要求(或自我提升)上升到对全国所有实验室的要求。
不过也有专家直言不讳,上述观点可能是对ISO有些偏见了,无论准则还是应用说明、指南,都并没有对自配试剂有任何歧视。对于非标方法,按照性能确认证明检测能力就可以。这也是国际上包括CAP通用要求。
当然也不排除是有些评审专家理解偏了,ISO对一些基础检验方法没有歧视和偏见,一些最基础的检验方法仍然可以被认可,就是最好例证。
溯源性(traceability)是ISO的特色。对自配常规试剂,只要有和批准的商业试剂比较质控记录就可以了。对于那些没有类似商业试剂的自配特殊试剂则要严格按溯源要求。这种试剂管理,基本要按照实验室自建项目(LDT)处理。而对于教科书上都有配方的试剂,推荐做有限验证即可。
反方观点
不建议增菌,容易污染。
美国在至年之间几位大咖包括杜克大学的LBReller发表了几篇文章,证实broth增菌并无太大影响,现在美国所说的增菌大概也就是GBS的“选择性増菌”。检验医学网
重庆的一位老师谈了谈他们单位的情况,脑脊液等无菌体液增菌有近30年历史,回顾分析发现CNS等分离率高,临床医生有诸多抱怨,增菌与否实验室内部也有不同看法。所以近几年他们尝试改变策略,不再用肉汤增菌,减少增菌这个最大的可能污染环节,改为离心取沉渣涂片及接种平板。
当然其间做了对照,就是同时增菌和不增菌,做了大约几个月,病原菌分离率未见明显差异,但是污染率有下降。所以最终决定,脑脊液等无菌体液都不用肉汤增菌了,改进为离心取沉渣接种了。目前运行效果不错。
脑脊液液体培养基增菌除了导致过度治疗和滥用抗菌素外,还在可能引起误诊,比如病人患有结核性脑膜炎或肠道病*感染的情形。
如您有自己的观点,欢迎文末留言交流
本文整理自“中美临床微生物高端论坛”